人類多能干細胞（hPSCs）包括人類胚胎干細胞（hESCs）和人類誘導多能干細胞（hiPSCs）。這類干細胞具有無限的自我復制和多項分化潛能，是再生醫學、疾病建模和藥物篩選研究的重要工具。近年來，研究人員已開發出多種方案，通過導入外源基因或者利用小分子誘導等方法，將人類多能干細胞分化為骨骼肌細胞（SkMCs），從而為骨骼肌損傷和肌營養不良等肌肉相關疾病的研究和藥物篩選提供了新的途徑。雖然目前有許多方法可以將hPSCs分化成SkMCs，但大多數方法都涉及到3D球狀胚體的形成以及細胞分選，過程復雜，難以大量獲得肌原細胞，骨骼肌形成率極低，很大程度上影響了肌肉再生醫學研究的進展。如能在“hPSCs分化為骨骼肌”研究方面取得突破，就能為細胞療法或藥物篩選帶來充足的肌細胞，例如從肌營養不良患者體內取出的干細胞分化產生的肌原細胞，可為該患者的提供很好的治療原料，同時還能對這類肌肉相關性疾病進行更深入的研究。因此，如何構建一個高效的體外肌原性祖細胞分化平臺是突破肌肉再生醫學研究領域的一個關鍵技術瓶頸。

 這里小編為大家推薦一種非常簡單但高效，僅需三個步驟就能將hPSCs分化為成熟骨骼肌細胞的新方法——來自Myocea公司的Skeletal Muscle Differentiation Kit（hPSC誘導分化骨骼肌試劑盒）。該方法的優點是僅需要單層細胞培養就可以制備出大量的SkMCs，而無需表達肌原性轉錄因子或細胞分選等額外操作。由于成肌祖細胞和成肌細胞具有很高的增殖能力，可以通過常規傳代方式進行大規模擴增，從而獲得大量分化的肌管細胞。因此，該方法非常簡單高效，并且適用于自動化和大規模生產。實驗表明，僅用6×104個hPSCs就可以生產出7.5×107個SkMCs，說明了該方法具有很高的效率和可擴展性。

 Myocea的Skeletal Muscle Differentiation Kit是世界首款能將hPSCs分化為骨骼肌細胞的商品化培養基系統，由四個培養基組成。通常情況下，從人多能干細胞生成肌細胞需要3個階段（如上圖），即依次生成衛星樣祖細胞（satelite-like progenitor cells）和成肌細胞（myoblasts），最后融合成為多核肌管細胞（multinucleated myotubes）。因此Skeletal Muscle Differentiation Kit包含了三個分化階段所需的三種培養基，此外它還提供了一個促進肌管融合的培養基作為可選組分，可根據研究者希望得到的細胞表型靈活選擇。骨骼肌分化系統的四個培養基詳情見下表。

 用該培養系統分化生成的肌細胞通常由70-90%的肌管細胞和10-25%的肌前體細胞組成。如下圖細胞標志物染色顯示肌細胞表型成熟且功能完整。

更重要的一點是，通過標志物的核酸與蛋白表達水平的比對發現，該方法具有很高的可重復性，幾株不同的干細胞系分化實驗比對顯示組間差異很小，穩定性非常好。因此，Skeletal Muscle Differentiation Kit還適用于高通量篩選和藥物開發。

綜上所述，Skeletal Muscle Differentiation Kit包括了以下優勢特點，確實是一個令人心動的骨骼肌分化方案。

•  肌細胞生成率高。
• 三步法操作簡單，無需細胞分選，無需表達肌原性轉錄因子。
• 實現了成肌細胞的擴增和儲存，從而建立可再生的肌細胞庫。
• 方法穩定，重復性好。

Myocea, Inc.是一家專注于提供神經肌肉疾病領域產品與服務的公司，是能夠為相關制藥企業提供專業試劑與合同服務的學術型戰略合作者。Myocea公司是目前世界上擁有最大的人類胚胎干細胞的細胞庫之一，并已開發和推出了世界首款穩定、高效且可擴展的專業骨骼肌細胞分化培養基系統。

北京西美杰科技有限公司是Myocea品牌的中國區總代理，為用戶提供完善的技術支持與售后服務。如對以上產品感興趣，歡迎撥打西美杰客服熱線400-050-4006或登錄網站m.5uly.cn了解更多信息。

參考文獻：

A Human Pluripotent Stem Cell Model of Facioscapulohumeral Muscular Dystrophy-Affected Skeletal Muscles. Stem Cells Transl Med. 2016 Sep;5(9):1145-61.